▲貴州鳳岡
兒茶素、沒食子酸、咖啡堿等茶功能成分具有多種生物活性和藥理功效，包括抗氧化，抗癌，抗炎，降脂減肥，降低膽固醇，降血糖等，在普通食品、保健食品、醫(yī)藥、日化用品、功能飼料等均有應(yīng)用，開發(fā)前景非常廣闊。
☆ 兒茶素是茶多酚中含量相對較高、生物活性較強(qiáng)的化學(xué)物質(zhì)。兒茶素具有多個酚羥基的分子結(jié)構(gòu)，在貯藏和應(yīng)用的過程中，易受到溫度、酸堿、空氣、濕度、金屬離子等因素影響，發(fā)生降解、氧化聚合等反應(yīng)，從而改變其原有的物化性質(zhì)、風(fēng)味品質(zhì)、生物活性。不同類型的酯型兒茶素和非酯型兒茶素的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，決定了其穩(wěn)定性、氧化還原特性、水解特性、異構(gòu)特性等均存在較大差異。因此，如何保持其穩(wěn)定性非常關(guān)鍵，相關(guān)的穩(wěn)態(tài)化技術(shù)研究是茶學(xué)領(lǐng)域熱點(diǎn)研究問題之一。
☆ 沒食子酸是茶葉中可水解多酚類物質(zhì)的組成部分，在云南普洱茶中的含量相對較高，不僅與茶葉品質(zhì)呈正相關(guān)，而且具有抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗突變等多種生物活性。
☆ 咖啡堿最早是在咖啡中被發(fā)現(xiàn)，但茶葉中的咖啡堿含量比咖啡中的含量高，咖啡中咖啡堿的含量為1%~2%左右，而茶葉中咖啡堿的含量為2%~5%左右，約占茶葉生物堿總量的95%以上?？Х葔A不僅是茶葉風(fēng)味品質(zhì)特征成分之一，而且具有強(qiáng)心、利尿、興奮中樞神經(jīng)等作用。有關(guān)沒食子酸和咖啡堿在不同溫度條件下的穩(wěn)定性文獻(xiàn)報道相對較少。
溫度是影響兒茶素、沒食子酸、咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素，對其在終端應(yīng)用體系的物化特性、風(fēng)味品質(zhì)、生物活性保持具有非常重要的影響。30 ℃是發(fā)酵類茶食品、茶酒的發(fā)酵溫度，而且也是紅茶發(fā)酵工序葉溫重要參數(shù)，溫度過高則發(fā)酵變化過分激烈、香低味淡、色暗，溫度過低則發(fā)酵時間延長、內(nèi)質(zhì)轉(zhuǎn)化不充分、風(fēng)味寡淡。60 ℃不僅是普洱茶殺青工藝的控制溫度，而且也是茶點(diǎn)心、茶面包等熱加工茶食品貯存的底限溫度。文章以-18 ℃冷凍保存為對照，探索了30 ℃、60 ℃溫度條件下茶兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的變化規(guī)律，分析溫度對酯型兒茶素、非酯型兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的影響，以期為茶產(chǎn)品貯藏保鮮和穩(wěn)態(tài)化利用研發(fā)提供理論基礎(chǔ)。
01
材料與方法
1、試驗(yàn)方法
(1) 貯藏穩(wěn)定性設(shè)計
稱取0.5 g的98%茶多酚樣品，放入2 mL帶蓋圓底塑料管內(nèi)，加蓋密封貯藏，然后分別放置在溫度為30 ℃、60 ℃的恒溫箱中，以-18 ℃冰箱貯藏為對照，每隔7天取樣，連續(xù)70天取樣，取樣后的塑料管不再放回;分別配制1.0 mg/mL水溶液，HPLC檢測不同取樣點(diǎn)的酯型兒茶素(EGCG、GCG、ECG、CG)、非酯型兒茶素(EGC、GC、EC、C)、沒食子酸和咖啡堿的含量。
(2) 茶兒茶素、沒食子酸和咖啡堿HPLC檢測方法
色譜柱Hypersil BDS C18 (4.6 mm × 250 mm， 5 μm)，流動相A為2%乙酸，流動相B為100%乙腈，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃，檢測波長280 nm，進(jìn)樣量5 μL，梯度洗脫，流動相B在12 min內(nèi)由6.5%線性梯度變化到8%，16 min變化到15%，20 min變化到25%，30 min回到初始狀態(tài)，平衡5 min。
2、數(shù)據(jù)處理
每個實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，采用Minitab 19.0數(shù)據(jù)處理軟件，進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。
02
結(jié)果與分析
1、溫度對酯型兒茶素貯藏穩(wěn)定性的影響
通常情況下，茶多酚、兒茶素類物質(zhì)適宜低溫貯藏。文章以-18 ℃冷凍保存為對照，考察了30 ℃、60 ℃條件下酯型兒茶素含量變化情況。
由圖1可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的EGCG和GCG含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃和60 ℃條件下隨貯藏時間延長，EGCG含量均呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，30 ℃條件EGCG含量與對照無顯著性差異，60 ℃條件下EGCG含量顯著低于對照，60 ℃條件下的EGCG含量下降幅度明顯大于30 ℃條件下。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長GCG含量呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長GCG含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異;EGCG含量變化幅度大于GCG含量變化幅度，說明GCG熱穩(wěn)定性大于EGCG。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下EGCG和GCG含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，EGCG和GCG穩(wěn)定性較好，但是在60 ℃條件下，EGCG穩(wěn)定性顯著降低，部分EGCG發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成GCG，導(dǎo)致了EGCG含量快速下降，而GCG含量不降反增，即60 ℃條件下以EGCG向GCG轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
由圖2可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的ECG和CG含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長ECG含量變化較小，與對照無顯著性差異，穩(wěn)定性較好，60 ℃條件下的ECG含量下降幅度較大，穩(wěn)定性較差。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長CG含量呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長CG含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異;ECG含量變化幅度大于CG含量變化幅度，說明CG熱穩(wěn)定性大于ECG。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下ECG和CG含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，ECG和CG穩(wěn)定性較好，但是在60 ℃條件下，ECG穩(wěn)定性顯著降低，部分ECG發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成CG，導(dǎo)致了ECG含量快速下降，而CG含量不降反增，即60 ℃條件下以ECG向CG轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
2、溫度對非酯型兒茶素貯藏穩(wěn)定性的影響
兒茶素在相對較高的溫度條件下易發(fā)生異構(gòu)化和自動氧化作用。由圖3的不同溫度貯藏條件下EGC和GC含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的EGC和GC含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃和60 ℃條件下隨貯藏時間延長，EGC含量均呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，30 ℃條件下EGC含量與對照呈顯著性差異，60 ℃條件下EGC含量與對照呈極顯著差異，60 ℃條件下的EGC含量下降幅度明顯大于30 ℃條件下。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長GC含量基本不變，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長GC含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異;EGC含量變化幅度大于GC含量變化幅度，說明GC熱穩(wěn)定性大于EGC。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下EGC和GC含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，EGC降解或氧化聚合是其穩(wěn)定性下降的主要作用，而GC熱穩(wěn)定性較好;60 ℃條件下，部分EGC發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成GC，導(dǎo)致了EGC含量快速下降;GCG脫沒食子酰基也會變成GC，但是由于GCG在60 ℃下幾乎沒減少，而60 ℃條件下GC含量不降反增，推測GC增加的主要原因是EGC差向異構(gòu)化作用，即60 ℃條件下以EGC向GC轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
由圖4的不同溫度貯藏條件下EC和C含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的EC和C含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長EC含量基本不變，與對照無顯著性差異，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長EC含量呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，與對照呈顯著性差異。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長C含量逐漸下降，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長C含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，但均與對照無顯著性差異。EC含量變化幅度大于C含量變化幅度，說明C熱穩(wěn)定性大于EC。結(jié)合30 ℃、60 ℃貯藏條件下EC和C含量變化規(guī)律，可以推測：30 ℃條件下，EC和C穩(wěn)定性較好，但是在60 ℃條件下，EC穩(wěn)定性顯著降低，部分EC發(fā)生了差向異構(gòu)作用形成C，導(dǎo)致了EC含量快速下降。CG脫沒食子酸也會變成C，但是由于CG在60℃下幾乎沒減少，而60 ℃條件下C含量不降反增，推測C增加的主要原因是EC差向異構(gòu)化作用，即60 ℃條件下以EC向C轉(zhuǎn)化的差向異構(gòu)作用為主。
3、溫度對沒食子酸貯藏穩(wěn)定性的影響
由圖5的不同溫度貯藏條件下沒食子酸含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的沒食子酸含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長沒食子酸含量略有降低，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長沒食子酸含量呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢，但是30 ℃和60 ℃的沒食子酸含量與對照相比均無顯著性差異，即沒食子酸在30 ℃和60 ℃溫度條件下穩(wěn)定性均較好。酯型兒茶素EGCG、GCG、ECG、CG在一定溫度條件下，可發(fā)生脫沒食子酰基作用。
結(jié)合圖1、圖2和圖5結(jié)果，推測：60 ℃條件下酯型兒茶素EGCG、GCG、ECG、CG在發(fā)生差向異構(gòu)作用、降解或氧化聚合的同時，也發(fā)生了脫沒食子?；磻?yīng)，進(jìn)而出現(xiàn)圖5的60 ℃條件下沒食子酸含量隨貯藏時間延長不降反升的現(xiàn)象。比較而言，沒食子酸在3個溫度條件下的穩(wěn)定性要大于酯型兒茶素、非酯型兒茶素。
4、溫度對咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的影響
由圖6的不同溫度貯藏條件下咖啡堿含量變化的動力學(xué)曲線可以看出，-18 ℃冷凍保存條件下的咖啡堿含量沒有變化。與-18 ℃對照相比，30 ℃條件下隨貯藏時間延長咖啡堿含量基本沒有變化，而60 ℃條件下隨貯藏時間延長咖啡堿含量呈現(xiàn)略微下降的趨勢，但是30 ℃和60 ℃的咖啡堿含量與對照相比均無顯著性差異，即咖啡堿在30 ℃和60 ℃溫度條件下穩(wěn)定性均較好。
將圖1、圖2、圖3、圖4的兒茶素含量變化的動力學(xué)曲線，以及圖5的沒食子酸含量變化的動力學(xué)曲線，與圖6的咖啡堿含量變化動力學(xué)曲線比較，可以看出，在-18 ℃、30 ℃、60 ℃貯藏條件下，咖啡堿的穩(wěn)定性要大于酯型兒茶素、非酯型兒茶素。
03
討論
兒茶素分子結(jié)構(gòu)的固有化學(xué)特性，決定了其在外界環(huán)境改變的情況下，不僅僅會發(fā)生差向異構(gòu)化作用，而且會發(fā)生氧化聚合、分解、水解、脫沒食子?；榷喾N作用，這些作用之間可能存在競爭或協(xié)同作用，在某些特定的條件下，可能有幾種作用同時產(chǎn)生。前人研究茶湯溶液中兒茶素類物質(zhì)的穩(wěn)定性，結(jié)果表明，82 ℃有利于兒茶素發(fā)生降解和異構(gòu)化。研究表明溫度較低條件下茶湯中兒茶素主要發(fā)生降解反應(yīng)，溫度超過80 ℃時茶湯兒茶素主要發(fā)生異構(gòu)化反應(yīng)。采用不同溫度水浸提茶葉時發(fā)現(xiàn)，即使在低溫下浸提，茶湯中也有明顯的異構(gòu)化反應(yīng)，與此同時，其他的降解、氧化和聚合等反應(yīng)也同時存在。目前較多研究集中于茶葉功能成分在不同溫度溶液中的穩(wěn)定性，較少關(guān)注固體粉末不同溫度條件下的穩(wěn)定性。
文章研究了不同溫度條件下固體茶葉提取物中茶兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的變化規(guī)律，結(jié)果表明，在30 ℃條件下，EGC以降解或氧化作用為主，其它兒茶素相對穩(wěn)定性較好;60 ℃貯藏條件下，酯型兒茶素和非酯型兒茶素以差向異構(gòu)作用、脫沒食子酰基作用為主;GCG熱穩(wěn)定性大于EGCG，CG熱穩(wěn)定性大于ECG，C熱穩(wěn)定性大于EC，GC熱穩(wěn)定性大于EGC;沒食子酸、咖啡堿的穩(wěn)定性要大于酯型兒茶素、非酯型兒茶素。文章以-18 ℃冷凍保存為對照，考察了30 ℃、60 ℃溫度條件下兒茶素、沒食子酸和咖啡堿的穩(wěn)定性，可為兒茶素、沒食子酸和咖啡堿等功能成分在食品中的穩(wěn)態(tài)化應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。有關(guān)不同溫度條件下兒茶素的差向異構(gòu)化、氧化聚合、降解、脫沒食子?；榷喾N作用的競爭或協(xié)同關(guān)系，以及兒茶素、沒食子酸、咖啡堿在食品、飲料、日化用品等不同體系的穩(wěn)態(tài)化應(yīng)用特性仍有待進(jìn)一步研究。
作者簡介
張建勇
博士，助理研究員，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所茶葉深加工專家，德國布倫瑞克工業(yè)大學(xué)訪問學(xué)者，國家食藥同源產(chǎn)業(yè)科技創(chuàng)新聯(lián)盟常務(wù)理事。研究方向?yàn)椴枞~化學(xué)與多元化利用，主持省部級科研項(xiàng)目6項(xiàng)，發(fā)表中外文論文50余篇，參編著作1部，授權(quán)國家發(fā)明專利2項(xiàng)、實(shí)用新型專利6項(xiàng)，軟件著作權(quán)登記3項(xiàng)，獲獎1項(xiàng)。
基金項(xiàng)目：“十三五”國家重點(diǎn)研發(fā)計劃課題(2017YFD0400804);浙江省茶葉產(chǎn)業(yè)技術(shù)團(tuán)隊項(xiàng)目(2020-2022);浙江省自然科學(xué)基金(LY18C160004)
具體內(nèi)容詳見《中國茶葉加工》雜志，2020年第4期文章《溫度對茶多酚制品中兒茶素、沒食子酸和咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的影響》，頁碼：69-75。作者：張建勇，王偉偉，崔宏春，薛金金，江和源。
引用格式：張建勇，王偉偉，崔宏春，等. 溫度對茶多酚制品中兒茶素、沒食子酸和咖啡堿貯藏穩(wěn)定性的影響[J]. 中國茶葉加工, 2020(4): 69-75.
來源：中國茶葉加工
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兒茶素具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等功能，是茶葉中含量豐富的一類生物活性物質(zhì)。
由于酚羥基的高活潑性導(dǎo)致兒茶素在生物體外及體內(nèi)極易失去活性，致使其在生物體內(nèi)利用度不高。
近年來，納米生物技術(shù)的發(fā)展有望通過配體設(shè)計、精準(zhǔn)合成和智能調(diào)控等策略解決兒茶素低生物利用度的難題，并拓展其在生命健康領(lǐng)域中的應(yīng)用。
本文綜述了近幾年兒茶素生物醫(yī)用納米材料的研究進(jìn)展，重點(diǎn)闡述了兒茶素生物醫(yī)用納米材料的抗腫瘤、抗菌、抗炎、藥物遞送和抗病毒等活性，對兒茶素生物醫(yī)用納米材料的構(gòu)建和生物作用機(jī)制進(jìn)行了探討，并對兒茶素新材料設(shè)計及其應(yīng)用前景進(jìn)行了展望。
△ 圖1 兒茶素生物醫(yī)用納米材料應(yīng)用示意圖
一、兒茶素生物納米材料抗腫瘤研究進(jìn)展
癌癥是21世紀(jì)威脅人類健康的最大殺手，我國是人口大國，也是癌癥高發(fā)國家。針對威脅人類的殺手，化療手段則扮演了一個重要的角色，然傳統(tǒng)化療效果不佳及其導(dǎo)致的副作用等問題仍是我們抗癌路上的絆腳石。因此，迫切需要開發(fā)安全、高效的抗腫瘤療法。
兒茶素被認(rèn)定為一種天然、高效、安全的生物活性物質(zhì)，具有高效的抗腫瘤活性，但其也有一定的局限。
由于EGCG穩(wěn)定性差，其在光照、濕熱、堿性等外界條件下容易使分子結(jié)構(gòu)中具有生理活性的酚羥基發(fā)生氧化、縮合、聚合反應(yīng)，極大降低了生物活性;再加上其在生物體內(nèi)又易受到pH、金屬離子、酶等生理環(huán)境變化的影響而導(dǎo)致生物活性改變[1]，致使其無法在病灶部位達(dá)到有效濃度發(fā)揮生物活性。
針對上述出現(xiàn)的問題，相關(guān)研究人員往往會通過提高EGCG的口服或注射濃度，使其到達(dá)體內(nèi)特定部位積累到有效濃度發(fā)揮生理功能。然濃度的高低對其也有一定的影響，諸如高濃度EGCG劑量易引發(fā)一系列的副作用。由此，提高EGCG的給藥濃度并不是提高其體內(nèi)生物利用度的有效策略。
繼而，研究者們?yōu)榱顺浞职l(fā)揮EGCG生物活性，提高其在生物體內(nèi)的利用度，紛紛開始利用納米生物技術(shù)將EGCG進(jìn)行修飾(利用多糖、蛋白、聚合物、脂質(zhì)等[2-5]不同材料為載體制備EGCG納米顆粒)，這樣便極大提高了其穩(wěn)定性和生物利用度。
上述新興的多酚納米材料的出現(xiàn)豐富了生物醫(yī)學(xué)中材料的設(shè)計與選擇，為生物醫(yī)學(xué)中功能材料的選擇提供了支撐。
1.1
兒茶素脂質(zhì)體/膠束抗腫瘤進(jìn)展
大量研究證實(shí)，兒茶素納米脂質(zhì)化后可以有效保持其生物活性，顯著提高對食道癌、腺癌、乳腺癌、黑色素瘤、肝癌等多種癌癥的預(yù)防和治療作用[6-8]。
Hu等[9]將EGCG和淀粉樣原纖維進(jìn)行封裝，使EGCG納米粒子可以在pH 2.5~7.0范圍內(nèi)保持活性，并顯著提高EGCG在腸道的通透性和吸收。
Pace等[10]報道，EGCG殼聚糖納米脂質(zhì)體(CSLIPO-EGCG)在10?μmol·L-1濃度下對人乳腺癌細(xì)胞(MCF7)表現(xiàn)出抗增殖和促凋亡作用，而在此濃度下，游離EGCG沒有任何有益作用。
Bae等[11]通過藥代動力學(xué)和生物分布研究結(jié)果表明，靜脈注射HA-EGCG-順鉑復(fù)合物可增加藥物的體內(nèi)長循環(huán)和在腫瘤部位高效富集。由此，以綠茶兒茶素為基礎(chǔ)的順鉑膠束納米復(fù)合物有望成為一種安全高效的卵巢癌化療藥。
1.2
兒茶素納米金屬復(fù)合物抗腫瘤進(jìn)展
Hsieh等[12]將EGCG與納米金顆粒結(jié)合制備的納米材料具有良好的抗腫瘤功效。
Ren等[13]使用EGCG和酚酸鉑前體藥物合成的納米球(PTCG)可以通過級聯(lián)反應(yīng)提升生物體內(nèi)H2O2水平來協(xié)同殺傷腫瘤細(xì)胞。體外和體內(nèi)研究表明，EGCG修飾后的鉑類藥物實(shí)現(xiàn)了化療與化學(xué)動力學(xué)協(xié)同的抗腫瘤療效，并且和單獨(dú)的鉑藥相比，具有良好的生物安全性。
△ 圖2 EGCG與酚酸鉑前體藥物構(gòu)建的納米球?qū)崿F(xiàn)腫瘤殺傷示意圖
Yuan等[14]制備了聚焦羧甲基殼聚糖(FU-CMC)與金納米顆粒(GNPs)的納米復(fù)合材料(FU-CMC-EGCG-GNPs)，發(fā)現(xiàn)EGCG與金納米粒子結(jié)合表現(xiàn)出比EGCG單體更好的抗癌效果，所制備的納米復(fù)合材料成功抑制了胃癌細(xì)胞增殖。此外，EGCG納米復(fù)合物的高效抗腫瘤作用在多個試驗(yàn)?zāi)Ｐ椭幸呀?jīng)被證實(shí)。
1.3
其他兒茶素生物納米復(fù)合物抗腫瘤
研究進(jìn)展
Yi等[15]通過使用EGCG和天然的毛角蛋白制備出具有良好生物相容性、膠體穩(wěn)定性和刺激響應(yīng)型的納米遞送系統(tǒng)來遞送Dox，發(fā)現(xiàn)EGCG和Dox具有協(xié)同抗腫瘤作用。
Wang等[16]使用程序性死亡受體-1(PDL-1)抗體、EGCG、ICG和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP2)等構(gòu)建了一種復(fù)合納米顆粒，克服腫瘤免疫耐受，用于腫瘤的聯(lián)合免疫治療。
Siddiqui等[17]通過實(shí)驗(yàn)證明了nano-EGCG對黑色素瘤細(xì)胞Mel 928具有良好的抗增殖和促凋亡作用。
二、兒茶素生物納米材料抗菌研究進(jìn)展
有害病原微生物侵染人體會引發(fā)各種疾病，如皮炎、肺炎、腦膜炎、敗血癥等，嚴(yán)重情況下可導(dǎo)致死亡[18-21]。
隨著抗生素的不合理使用，導(dǎo)致了耐藥菌的暴發(fā)、高劑量抗生素使用帶來的毒副作用和復(fù)發(fā)性感染等嚴(yán)重衛(wèi)生問題，開發(fā)新型高效綠色的抗生素代替物是目前的研究熱點(diǎn)。
兒茶素是一種低毒、強(qiáng)效的抑菌物質(zhì)，研究表明兒茶素對耐藥性金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、結(jié)核桿菌等多種病菌具有抑制作用。
因此，為了推進(jìn)兒茶素在抗菌領(lǐng)域中的應(yīng)用，在低濃度下發(fā)揮其最高抗菌活性，科學(xué)家開始利用兒茶素構(gòu)建新型的生物抗菌材料，并且與其他抗菌離子組合，實(shí)現(xiàn)協(xié)同作用。
2.1
兒茶素納米球的抗菌作用進(jìn)展
Moreno-Vásquez等[22]研究發(fā)現(xiàn)，與EGCG單體和殼聚糖相比，EGCG殼聚糖納米顆粒(EGCG-g-chitosan-P)對金黃色葡萄球菌的抑菌活性增加,具有更高的生長抑制作用。
Huang等[23]研究發(fā)現(xiàn)，EGCG負(fù)載HTCC/LMWFNPs的抗菌活性顯著升高。
2.2
兒茶素納米金屬復(fù)合物抗菌進(jìn)展
Zhang等[24]將兒茶素(CAT)和兒茶素-Zn復(fù)合物(CAT-Zn)制備成不同粒徑的β-殼聚糖納米粒子(β-CS)，研究表明，相比于未包裹的CAT和CAT-Zn，β-CS包裹的CAT(β-CS-CAT)和CAT-Zn(β-CS-CAT-Zn)具有更強(qiáng)的抗菌活性，且小粒徑的納米?？咕钚愿摺?/p>
Rónavári等[25]利用咖啡和綠茶提取物成功制備了銀納米顆粒(C-AgNP和GT-AgNP)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)GT-AgNP的抑菌效果明顯優(yōu)于C-AgNP。
2.3
兒茶素納米生物高分子抗菌進(jìn)展
天然高分子水凝膠因其生物安全和生產(chǎn)成本低而成為一類常用的生物材料。然而，較差的力學(xué)強(qiáng)度和易被細(xì)菌感染等缺陷限制了其在組織工程領(lǐng)域中的應(yīng)用。
Wu等[26]通過簡單地浸泡方法將天然高分子浸泡在EGCG水溶液中構(gòu)建了具有高力學(xué)性能和抗菌生物功能的生物材料，結(jié)果發(fā)現(xiàn)甲基丙烯酸-茶多酚水凝膠(GelMA-TP)被證明可以促進(jìn)皮膚傷口愈合。
△ 圖3 茶多酚水凝膠的合成及小鼠皮膚傷口愈合率
Hu等[27]利用EGCG結(jié)合淀粉樣原纖維自組裝形成具有抗菌活性的可逆水凝膠，證實(shí)了EGCG水凝膠具有抗菌活性。
來源：中國茶葉學(xué)會
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癌癥是造成全球疾病負(fù)擔(dān)的主要原因，其死亡人數(shù)僅次于心血管疾病。2019年，204個國家和地區(qū)有2360萬各種癌癥病例和1000萬死亡病例。未來二十年全球癌癥負(fù)擔(dān)可能會繼續(xù)增加，預(yù)計到2040年將有2840萬癌癥病例。人們認(rèn)為飲食將是預(yù)防某些癌癥的有效途徑。
兒茶素是新鮮茶葉或綠茶中的一類具有生物活性的多酚成分，它們是茶葉健康益處的主要貢獻(xiàn)者。一般茶樹鮮葉中通常含有四種表型兒茶素，即(-)-表兒茶素(EC)、(-)-表沒食子兒茶素(EGC)、(-)-表兒茶素沒食子酸酯(ECG)和(-)-表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)。鮮茶葉中兒茶素含量最多的是EGCG，占兒茶素總含量的40%以上。
許多研究表明茶兒茶素具有抗癌作用。然而，茶兒茶素和茶葉消費(fèi)對癌癥風(fēng)險的影響仍然沒有定論和爭議。
流行病學(xué)和體內(nèi)研究表明，茶兒茶素對多種癌癥具有抗癌作用，包括婦科癌癥、消化道癌癥、腦膠質(zhì)瘤、肝膽癌、肺癌等。兒茶素通過抑制癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移、抗氧化和清除自由基，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，與抗癌藥物協(xié)同作用，涉及多條信號通路。
盡管已有大量體內(nèi)和體外研究表明茶兒茶素具有抗癌作用，但也觀察到和報道了不一致的結(jié)果，如日本一項(xiàng)為期 7 年(1995-2001 年)的基于人群的隊列研究涉及 41,440 名年齡在 40 至 79 歲之間的男性和女性患者，但沒有直接證據(jù)表明綠茶消費(fèi)與較低的肺癌風(fēng)險相關(guān)。
是什么導(dǎo)致了這些研究結(jié)果的不一致?
1、攝入兒茶素的代謝和/或化學(xué)變化可能是影響茶和兒茶素抗癌作用的重要因素。
2、兒茶素與部分藥物相互作用導(dǎo)致藥物生物利用度降低，可能導(dǎo)致藥物療效下降。
探索茶葉兒茶素在抗癌藥物開發(fā)中的潛力，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下課題：(1)攝入兒茶素在胃腸道中的代謝和保護(hù)攝入兒茶素免于降解或轉(zhuǎn)化的方法的開發(fā);(2)提高兒茶素生物利用度的技術(shù)，如膠囊化、納米?；?(3)具有協(xié)同抗癌作用的新型兒茶素配方。
來源：茶科學(xué)
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